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            KlenTaq-S 測(cè)序酶

            簡(jiǎn)要描述:KlenTaq-S 測(cè)序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無(wú)5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。

            • 產(chǎn)品型號(hào):
            • 廠商性質(zhì):代理商
            • 更新時(shí)間:2025-06-06
            • 訪  問(wèn)  量:2436

            詳細(xì)介紹

            品牌BIOHUB供貨周期兩周

            本公司 KlenTaq-S 測(cè)序酶是重組表達(dá),并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。

            活性定義活性單位指在 72℃下, 1×AM PCR Buffer 1,30 min 內(nèi)將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。特點(diǎn)

            1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應(yīng)

            2.相比全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶,本酶比活性有所降低

            適用范圍

            ddNTP 終止法DNA 測(cè)序(一代測(cè)序

            焦磷酸解反應(yīng)延伸法 SNP 分析

            質(zhì)量控制

            經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。

            酶貯存緩沖液

            20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

            應(yīng)用舉例

            以下反應(yīng)舉例為 50 μl 標(biāo)準(zhǔn) PCR 體系,僅供參考。實(shí)際 PCR 條件應(yīng)根據(jù)模板、引物、目的片段大小加以優(yōu)化,確定最佳反應(yīng)條件。

            1) 按下表配制反應(yīng)體系

            組份 

            體積/μl

            終濃度 

            10×AM PCR Buffer 1

            5

            dNTPs2.0 mM

            5

            0.2 mM

            引物 F10 μM

            1.5

            0.3 μM

            引物R10 μM

            1.5

            0.3 μM

            Template

            Varable*

            /

            KlenTaq-S測(cè)序酶(5U/μl

            0.5

            2.5U

            ddH2O

            Varable

            /

            總體積

            50

            /

            *模板DNA用量參數(shù)(50 μl反應(yīng)體系):

            人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng;PCR產(chǎn)物 1 ng-10 ng; Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

             

            2) 按如下條件進(jìn)行反應(yīng),

            95

            2-5 min


            95

            15 sec

             

            25-35 Cycles

            55~72

            20 sec

            72

            1kb/min

            72

            5 min


            3) 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR 產(chǎn)物,或按實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。

            注意事項(xiàng)1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似,對(duì)特定 DNA 的測(cè)序反應(yīng)可能需要優(yōu)化。2.本酶擴(kuò)增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,PCR 產(chǎn)量有所降低,不建議用于常規(guī) PCR3.不可用于 Taqman 探針?lè)?/span> q-PCR。


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