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            血漿游離血紅蛋白測定

            更新時間:2013-10-25      點擊次數(shù):3908

            實驗原理

              血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{紫色。根據(jù)顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

            實驗方法

              材料:

              1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

              2.1%H2O2

              3.10%醋酸溶液

              4.分光光度計

              方法:

              1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

              2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度。

            試劑 (ml)

            測定管

            空白管

            2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

            0.5

            0.5

            患者血漿

            0.02

            /

            1% H2O2

            0.5

            0.5

            混勻后室溫放置10min

            10%醋酸溶液

            5.0

            5.0

            室溫放置10min

              3.計算公式

              血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100

            實驗結果計算

              參考范圍:0-40mg/L

            注意事項

              1.一切容器避免血紅蛋白污染;

              2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;

              3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;

              4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

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