巨噬細(xì)胞去除實驗

 去除巨噬細(xì)胞是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。巨噬細(xì)胞可吞噬clodronate Liposome，在溶酶體的作用下，clodronate可釋放出來，當(dāng)其達(dá)到一定濃度時，可引起巨噬細(xì)胞的凋亡，從而去除巨噬細(xì)胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細(xì)胞，如肺、膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等；也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細(xì)胞，如肝臟和脾臟中的巨噬細(xì)胞。

1.       脂質(zhì)體的準(zhǔn)備

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2.       脂質(zhì)體的體內(nèi)注射

隔日尾靜脈注射200ul clodronate liposome，根據(jù)實驗要求制定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細(xì)胞的去除效率。

尾靜脈注射方法：

1.       將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi)，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈；

2.       將紗布浸泡于約70度的溫水中，拿出后包裹尾巴，以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的；

3.       行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約2cm一段，使皮膚緊張，靜脈更為充盈，右手持1ml針頭注射器，使針頭與靜脈平行（小于30°角），從尾巴的下1/4處進(jìn)針，開始注入藥物時應(yīng)緩慢，仔細(xì)觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明已刺入血管，可正式注入藥物。

有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2min，止血。