澳大利亞Biosensis公司Fluoro-Jade C (FJC) 退化神經元染色試劑盒介紹

一、基礎信息  

1. 產品貨號與名稱  

  - 貨號：TR-100-FJT、TR-100-FJ

  - 英文名稱：Fluoro-Jade C (FJC) Ready-to-Dilute Staining Kit for identifying Degenerating Neurons  

  - 中文名稱：Fluoro-Jade C (FJC) 退化神經元染色試劑盒

2. 規格與品牌  

  - 規格：20 mL、40mL

  - 品牌：Biosensis

二、核心原理  

1. Fluoro-Jade C 的化學特性  

  Fluoro-Jade C（FJC）是一種陰離子熒光素衍生物，通過特殊化學修飾增強了與變性神經元的親和力。其分子結構包含多個羧基基團，使其在生理條件下帶負電荷，能夠特異性結合變性神經元膜表面暴露的酸性磷脂和變性蛋白質（如磷酸化神經絲）。  

2. 染色機制  

  - 變性神經元識別：當神經元發生退行性變時，細胞膜通透性增加，酸性成分暴露。FJC通過靜電相互作用和疏水效應結合這些成分，形成穩定的熒光標記。  

  - 高分辨率成像：FJC的激發峰為495 nm，發射峰為521 nm，與FITC濾光片兼容，可清晰顯示退化神經元的胞體、樹突、軸突及末端形態，分辨率顯著優于傳統銀染和早期Fluoro-Jade染料（如FJ、FJB）。  

  - 抗褪色性能：FJC分子結構中的剛性平面設計使其具有優異的抗光漂白能力，染色結果可長期保存（4℃避光保存數周），適合高分辨率共聚焦顯微鏡成像。  

三、解決實驗中的關鍵問題  

1. 傳統方法的局限性  

  - 銀染技術：操作繁瑣、耗時（需2-3天），且無法與免疫熒光標記兼容，難以實現多重染色。  

  - TUNEL法：僅檢測DNA斷裂，無法顯示神經元整體形態，且對早期變性神經元不敏感。  

  - 硫黃素S等染料：特異性差，易與淀粉樣斑塊非特異性結合，背景干擾嚴重。  

2. FJC染色的突破性解決方案  

  - 全階段變性神經元檢測：可同時標記凋亡、壞死和自噬性死亡的神經元，覆蓋從早期胞體腫脹到晚期軸突斷裂的完整退變過程。  

  - 形態學與功能學結合：在顯示神經元退變的同時，可與NeuN、TH等抗體進行多重染色，明確退變神經元的類型和功能狀態。  

  - 多組織兼容性：適用于新鮮冷凍、多聚甲醛/福爾馬林固定及石蠟包埋組織，無需復雜預處理即可獲得高質量染色結果。  

四、技術優勢  

1. 即用型設計，簡化實驗流程  

  - 試劑盒包含FJC染色液、DAPI復染液、氫氧化鈉和KMnO?，無需自行配制，直接使用。  

  - 標準化操作步驟：組織切片經固定、通透化后，只需依次浸入KMnO?（消除背景）、FJC染色液（30分鐘）和DAPI（5分鐘），全程可在2小時內完成。  

2. 高靈敏度與特異性  

  - 信噪比優勢：FJC的信號背景比顯著高于FJB和硫黃素S，在低倍鏡下即可清晰觀察退變神經元的分布，尤其適合大樣本定量分析。  

  - 非特異性染色控制：通過KMnO?預處理消除組織內自發熒光，結合DAPI復染細胞核，可有效區分神經元與血管、膠質細胞等非特異性染色。  

3. 兼容性與靈活性  

  - 多重熒光標記：FJC的激發/發射光譜與Alexa Fluor 488、Cy3等常用熒光素無重疊，可與β-淀粉樣蛋白（Aβ）、磷酸化tau蛋白等抗體聯合使用，實現退變神經元與病理標志物的共定位分析。  

  - 跨物種應用：已在小鼠、大鼠、猴及人類腦組織中驗證，適用于多種神經退行性疾病模型（如5×FAD轉基因小鼠、MPTP誘導的PD模型）。  

4. 抗干擾與穩定性  

  - 抗組織處理干擾：對福爾馬林固定、石蠟包埋等劇烈處理具有耐受性，染色結果重復性高。  

  - 長期保存性能：未開封試劑盒可在4℃穩定保存12個月，稀釋后的染色液需在4小時內使用以確保最佳效果。  

五、應用場景與客戶群體  

1. 核心應用領域  

  - 神經退行性疾病研究：  

    - 阿爾茨海默?。ˋD）：檢測Aβ斑塊周圍的退變神經元，研究突觸丟失與認知功能的關系。  

    - 帕金森?。≒D）：在MPTP誘導的小鼠模型中，定位黑質致密部（SNc）多巴胺能神經元的退變過程。  

    - 肌側索硬化（ALS）：分析脊髓運動神經元的軸突退變與膠質細胞反應。  

  - 神經損傷與修復研究：  

    - 腦缺血模型：檢測缺血半暗帶神經元的退變動態，評估溶栓治療效果。  

    - 脊髓損傷模型：追蹤軸突再生過程中退變軸突的清除效率。  

  - 藥物研發與毒性評估：  

    - 神經保護藥物篩選：在細胞或動物模型中驗證候選藥物對退變神經元的保護作用。  

    - 神經毒性評價：評估藥物、重金屬等對中樞神經系統的損傷機制。  

2. 目標客戶群體  

  - 科研機構與高校：神經科學、病理學、藥理學實驗室，用于基礎機制研究和論文發表。  

  - 生物醫藥企業：藥物研發部門，用于神經退行性疾病藥物的臨床前模型驗證。  

  - CRO公司：提供外包染色服務，支持藥物毒理學評價和病理分析。  

六、訂貨信息  

1. 中國代理商：上海起發

2. 注意事項  

  - 價格咨詢：產品價格需通過代理商獲取，根據訂購量可享批量折扣。  

  - 運輸與保存：試劑盒需4℃避光保存，運輸過程中使用冰袋確保穩定性。  

  - 實驗建議：  

    - 組織切片需充分固定（多聚甲醛或福爾馬林），避免非特異性染色。  

    - 染色后切片應避免長時間暴露于強光下，建議使用抗褪色封片劑（如含DAPI的SlowFade Gold）。  

    - 新鮮稀釋的FJC染色液好用，剩余溶液可冷藏避光保存48小時，但需在使用前過濾以去除沉淀。  

七、技術驗證與典型案例  

1. 實驗流程驗證  

  - 組織處理：取MPTP誘導的PD小鼠中腦切片，經4%多聚甲醛固定后，依次用KMnO?（0.01%）處理5分鐘、FJC染色液孵育30分鐘、DAPI復染5分鐘，封片后在熒光顯微鏡下觀察。  

  - 結果顯示：黑質致密部（SNc）可見大量FJC陽性神經元，胞體皺縮、樹突斷裂，與TH免疫熒光染色結果共定位，證實退變神經元為多巴胺能神經元。  

2. 多重染色應用  

  - 實驗設計：在5×FAD轉基因小鼠腦切片中，同時進行FJC染色和Aβ免疫熒光標記（Alexa Fluor 594偶聯抗體）。  

  - 結果顯示：FJC陽性神經元環繞Aβ斑塊分布，提示斑塊周圍神經元退變與Aβ沉積密切相關。  

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