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            重組豬源RNase抑制劑說明書

            更新時間:2023-04-21      點擊次數(shù):1481

            重組豬源RNase抑制劑說明書

            上海起發(fā)生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌,打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè),共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè),圓夢中國。

            產(chǎn)品詳情

            貨號

            規(guī)格

            價格

            78BAB10003-100uL

            100uL(4KU)

            200.00

            78BAB10003-1ml

            1ml (40KU)

            1600.00

            78BAB10003-50ml

            50ml (2MU)

            50000.00

            產(chǎn)品描述

            本產(chǎn)品是以大腸桿菌中進行表達,并通過親和層析純化的重組豬源RNase抑制劑,該蛋白特征與豬肝和人胎盤來源此類酶相似,可替代天然提取 RNase Inhibitor的應(yīng)用。本產(chǎn)品與RNase A形成1: 1復(fù)合體,抑制RNase活性。該反應(yīng)是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復(fù)合體,使RNase復(fù)性而抑制劑不可逆失活。本產(chǎn)品與其它競爭性抑制劑(核酸類,無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應(yīng)體系中除去,但不能抑制逆轉(zhuǎn)錄酶的RNase H的活性。使用時可直接加入含有RNA的反應(yīng)液中用于cDNA第一鏈合成、體外轉(zhuǎn)錄和體外翻譯等實驗。

            產(chǎn)品特點

            ·     cDNA合成

            ·      體外轉(zhuǎn)錄

            ·      體外翻譯

            ·      1-Step RT-qPCR

            產(chǎn)品組分

            緩沖液成分:20 mM HEPES-KOH(pH 7.6),50mM KCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。

            使用方法

            使用方法

            溫馨提示:需要用無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預(yù)混液

            1 cDNA合成

            (1)在無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預(yù)混液

            組分

            反應(yīng)體積(10ul)

            Oligo(dT)20

            (或Random primer)

            (或基因特異引物)

            25pmoles

            (25pmoles)

            (5pmoles)

            10mM dNTPs

            2µL

            模板RNA

            2pg-5µg

            DNase/Rnase Free Water

            10ul

            2)65℃加熱5min,立即置于冰上

            組分

            反應(yīng)體積(10ul)

            RNA引物預(yù)混液

            10ul

            5x RT Buffer

            4µL

            BIOHUB Reverse Transcritase

            1ul

            RNase inhibitor(40U/µL)

            1ul

            100mM DTT

            2ul

            DNase/Rnase Free Water

            補足20ul

            3)輕輕混勻,按如下反應(yīng)條件設(shè)置

            逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件

            1

            42℃

            20-60min

            2

            99℃

            5min

            備注:逆轉(zhuǎn)錄溫度可在42-60之間調(diào)整,反應(yīng)時間建議在20-60min內(nèi)調(diào)整

             

            4)得到的cDNA溶液可以直接用于第二鏈cDNA合成及后續(xù)PCR反應(yīng)。

            優(yōu)化參考方法

            優(yōu)化參數(shù)

            參考范圍

            逆轉(zhuǎn)錄

            50-60℃ 5-15min

            預(yù)變性溫度時間

            95-98℃ 10sec-5min

            變性溫度

            95-98℃ 3sec-10sec

            延伸/退火溫度

            60-65℃ 5sec-30sec

            注意事項

            1. 本產(chǎn)品在PH7?8時表現(xiàn)最佳抑制RNase活性。

            2. 本產(chǎn)品發(fā)揮活性作用至少添加1 mM的DTT。

            3. 本產(chǎn)品不抑制RNase H活性及逆轉(zhuǎn)錄酶活性。

            運輸及保存方法

            -20℃可保存12個月。



            上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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