支原體清除試劑2(1000x)說明書

支原體清除試劑2(1000x)說明書

上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè)，共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè)，圓夢中國。

產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品描述

本公司開發(fā)的支原體清除試劑1含有抑制支原體蛋白質(zhì)合成的藥物，而支原體清除試劑2含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機理不同，支原體清除試劑1需要處理不少于15天，而支原體清除試劑2只需處理7天。兩者都可以達到殺滅和清除支原體的目的。

使用方法

使用方法

1. 使用之前，先將支原體清除試劑2（注意：支原體清除試劑2在-20 ℃保存后，解凍時可能會有細小的結(jié)晶析出）用PBS 或者無血清培養(yǎng)液稀釋10倍后（此時，支原體清除試劑2應(yīng)該溶解），放 4℃冰箱保存。

2. 將 50-100萬個細胞鋪到60mm的細胞培養(yǎng)皿內(nèi)，加入4mL含支原體清除試劑2的正常細胞培養(yǎng)液（使用稀釋 10倍后的支原體清除試劑 2，按 1:100 比例加入）。

3. 每1-2天更換細胞培養(yǎng)液。換液時，用PBS沖洗2-3遍細胞，以將死亡的支原體清洗干凈。而后加入新鮮的含支原體清除試劑2的正常細胞培養(yǎng)液。期間如果細胞密度過大，請保持細胞密度適當(dāng)（貼壁細胞可能需要胰酶消化），并更換新的培養(yǎng)皿。

4. 處理7天后，可以用支原體檢測試劑盒進行檢測，檢測支原體是否殺滅。如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理 3天。

5. 以后每隔1個月進行支原體的常規(guī)檢測，以保證沒有新的支原體污染。

實驗案例分析

如上圖所示，左側(cè)為未經(jīng)支原體清除試劑處理的人 Hela 細胞,經(jīng) DAPI 染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質(zhì)也有大量的絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，這些處于細胞質(zhì)的核酸物質(zhì)就是支原體 DNA。而右側(cè)為經(jīng)過本公司的支原體清除試劑 2 處理 7 天的 Hela 細胞，經(jīng) DAPI 染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質(zhì)沒有任何絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，說明支原體已經(jīng)被清除。

注意事項

l 建議將細胞分成三份：第一份添加清除試劑1，第二份添加清除試劑2，第三份同時添加清除試劑1和清除試劑2進行殺滅（注：同時添加兩種藥物可能對細胞的毒性較大，但是殺滅的概率會非常高）， 這樣支原體對兩種藥物同時產(chǎn)生抗性和處理過程中細胞同時死亡的概率會非常低。如果同時添加清除試劑 1 和清除試劑 2，細胞可以每 2 天更換一次培養(yǎng)液。

l 處理過程中，注意每天觀察細胞的狀況，如果發(fā)現(xiàn)支原體清除試劑對細胞的毒性較大，可以加大培養(yǎng)液中的血清濃度或者提高細胞的密度。

l 清除試劑1和清除試劑2在降低濃度后（使用稀釋10倍后的支原體清除試劑1或者 2，再按 1:500 比例加入，即藥物的最終稀釋比例為 1:5000）也可以加入到培養(yǎng)液中作為短期（1-2個月）的支原體污染預(yù)防藥物，但是不建議在細胞培養(yǎng)液中長期（超過2個月）加入，因為有可能導(dǎo)致對該兩種藥物有抗性的支原體出現(xiàn)。

運輸及保存方法

該產(chǎn)品在常溫下運輸，收到產(chǎn)品后請放于-20 ℃保存，該條件下，至少可以保存 2 年。