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proaxsis PA004-1操作指南

更新時間：2021-03-22 點擊次數(shù)：2426

NEATstik®（10盒）

PA004-1（單個試劑盒）和PA004-10（10個試劑盒）

NEATstik®是一項快速的即時護理測試，可以監(jiān)測痰液樣本中活性中性粒細胞彈性蛋白酶的水平。

NEATstik®通常以10個測試盒的形式提供。如果需要，可以提供單項測試，費用為£28英鎊，另加運費和增值稅（如果有）

預期用途

NEATstik®是一種一次性體外診斷試劑，用于定性檢測痰液樣本中的活性中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)。本產品僅供醫(yī)療保健專業(yè)人士使用。

背景

中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)是一種絲氨酸蛋白酶，儲存在中性粒細胞中直至活化和釋放。NE有三種形式：作為活性酶、無活性酶原或抑制劑結合酶。活性NE是一種降解酶，在正常生理情況下，參與

在炎癥和消除微生物感染中1。然而，在肺部疾病中，當發(fā)現(xiàn)高濃度的活性NE時，這種降解能力引起過度的組織降解，損傷氣道壁有助于破壞性和惡性的炎癥周期2。

痰中的活性NE是感染和炎癥的已確定生物標志物，與炎性肺病的感染嚴重程度相關，包括但不限于囊性纖維化(CF)、慢性阻塞性

肺部疾病(COPD)和支氣管擴張癥3-5。持續(xù)監(jiān)測痰液中這種臨床上有用的生物標志物可能有助于這些肺部疾病的管理。

試驗原理

NEATstik®利用ProteaseTag®技術特異性檢測痰液樣本中的活性NE。

NEATstik®由封裝在塑料盒內的側流試紙組成。試紙條由膜和墊組成，置于固體載體上，應用結合物和兩條反應線：供試(T)線和對照線

(C)線。結合物是ProteaseTag®（旨在與活性NE特異性相互作用）和有色金顆粒的混合物。供試(T)細胞系由可檢測NE的抗體和對照(C)細胞系可檢測結合物組成。

樣品稀釋后，向NEATstik®的樣品端口加入小體積，開始檢測過程。稀釋樣本沿試紙移動，并與結合物相互作用。結合物中的ProteaseTag®將與樣本中存在的活性NE結合，沿試紙上行并與供試品結合

(T)線。過量結合物將與對照(C)線結合。

檢測線的外觀確認了樣品中存在的活性NE高于預先設定的閾值。

質控線的外觀證實檢測正確進行。

試劑盒組分

每個復合包裝盒包含10個套件。

每個試劑盒包含：

密封箔袋中的1×NEATstik®側流檢測

1 xNEATstik®樣本稀釋緩沖液(20 mL)1 x痰液稀釋罐

1 x雙球吸管1 x刻度吸管1 x說明書

需要但未提供的材料

痰液收集罐稱量秤或天平秒表/計時器

試驗程序

收集樣品

采集樣本進行檢測時，要求患者將痰液（不是唾液）咳入痰液采集壺（未提供）。建議立即檢測樣品。

樣品制備

加入NEATstik®前，必須稀釋痰液樣本。

將痰液稀釋罐的底部放在稱量天平上。稱量天平去皮重（零）。

將痰液稀釋罐保持在稱量天平上，使用抹刀（連接在痰液稀釋罐的蓋子上）將1-2 g痰液從痰液收集罐中轉移到痰液稀釋罐中。
記錄轉移痰液的重量(g)。痰液稀釋罐應保持在稱量天平上。
使用以下計算公式計算NEATstik®樣品稀釋緩沖液產生10倍稀釋所需的量：

痰液重量 = g

x 9

= g NEATstik®

樣品稀釋緩沖液

稱量天平去皮重（零）。
使用刻度移液管，將NEATstik®樣本稀釋緩沖液轉移至痰液稀釋罐中，直至計算重量。
將蓋子放在痰液稀釋罐上，并確保其擰緊。
倒置痰液稀釋槽，使痰液與緩沖液混合

10次。

檢測方法（續(xù)）

執(zhí)行測試

從鋁箔包裝中取出NEATstik®，置于水平面上，觀察窗朝上。
取下痰液稀釋罐的蓋子。
使用雙球吸管吸取稀釋痰液樣本。盡量確保

讀取結果和質量控制

如果檢測成功完成，對照(C)線將以紅線顯示（顏色強度可能不同）。如果質控(C)線不可見，則結果無效，應使用新樣本和新的檢測試劑盒重復檢測。

如果TEST(T)線可見，則確認痰液樣本中存在大于預設閾值的活性NE。

性能特征

使用58份冷凍痰液樣本評估NEATstik®檢測的性能。使用ProteaseTag®Active NE免疫測定法(ProAxsis Ltd)定量測定活性NE。

42份樣本有痰液NE濃度

< 8µg/mL = 陰性

16份樣本有痰液NE濃度

> 8µg/mL = 陽性

該檢測對16份NE定量高于8µg/mL的痰液樣本中的16份給出了陽性結果（100%靈敏度），對42份NE定量低于8µg/mL的痰液樣本中的36份給出了陰性結果（86%特異性）。

使用限制

僅用于稀釋痰液樣本

為獲得準確結果，請遵循提供的說明

NEATstik®結果必須結合其他臨床和患者進行評價

處置

痰液樣本和使用的檢測組分具有潛在生物危害性。根據(jù)當?shù)嘏R床廢物指南適當處置使用過的檢測試劑盒和痰液樣本。

參考文獻

Pham,C.(2008)International Journal of Biochemistry&Cell Biology,40(6-7),1317-1333.
Sandhaus,R.&Turino,G.(2013)COPD,10(S1):60-63.
Sagel,S. et al(2012)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,186(9):857-865
Mayer-Hamblett,N. et al(2007)美國呼吸與重癥醫(yī)學雜志，175:822-828
Chalmers,J.D. et al(2016)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine 195:1384–1393.

僅溶液-無痰液“結塊”。

醫(yī)療保健專業(yè)人員可獲得的數(shù)據(jù)。

NEATstik®不能定量痰液樣本中的活性NE。