ubiquigent 60-0001-010說明書

ubiquigent 60-0001-010說明書 

• Ubiquitin [untagged]泛素[未標記]
  60-0001-010
  10 mg
  £250

• 物種
  牛的
• 來源
  紅細胞
• 數量
  10毫克
• 貯存
  4°攝氏度
• 公式
  粉末（從溶解在水中的蛋白質凍干）；根據需要補水
• 分子量
  ?8.6 kDa
• 穩定
  在4°C凍干1年；-20°C復水6個月；根據需要等分
• 蛋白質序列
  登記號：P62990.1。有關完整蛋白質序列的信息，請下載分析證書pdf。
• 質量檢查；活動
  E2-泛素硫酯負載試驗：泛素的活性通過經由轉硫基化反應將泛素加載到UBE2N E2酶的活性半胱氨酸上來驗證。在T 0和T 10分鐘這兩個時間點比較了在30°C ATP存在下泛素，UBE1和UBE2N酶的孵育。確認了遍在蛋白/ UBE2N硫酯鍵對還原劑DTT的敏感性。

• 泛素是高度保守的蛋白質，在泛素化途徑中起關鍵作用。泛素僅在真核生物中發現，遍歷整個序列均顯示出很強的序列保守性（Wilkinson，1995）。遍在蛋白存在于所有細胞類型中，以游離形式存在，或通過其C端甘氨酸和ε之間的共價鍵與蛋白綴合-賴氨酸殘基的氨基；被稱為泛素化或泛素化的過程。泛素化是一種受多酶級聯影響的重要細胞過程，該級聯涉及三類酶，稱為激活酶（E1s），結合酶（E2s）和蛋白質連接酶（E3s）。E1以ATP依賴的方式激活泛素，導致在泛素的羧基末端和E1酶之間形成硫酯鍵。然后在泛素的羧基末端和E2以及（在某些情況下）E3酶的特定半胱氨酸之間產生順序的，瞬態的硫酯鍵（Bonifacino和Weissman，1998）。終，在泛素的甘氨酸羧基末端和ε之間形成一個異肽鍵-靶蛋白上的賴氨酸殘基的氨基（單-泛素化）或另一泛素上的賴氨酸殘基的氨基，導致泛素鏈的產生（多泛素化），其可以是Lys-6，Lys-11，Lys-27，Lys- 29，Lys-33，Lys-48或Lys-63連鎖（Komander，2009）。泛素鏈本質上也可以是線性的，是通過一個泛素部分的活化甘氨酸殘基與α綴合形成的-另一個泛素N末端的N-氨基。特定的泛素鏈類型采用不同的構象，這在其功能方面可能很重要。盡管已經確定了某些鏈類型的某些功能，但其中許多結構的作用仍有待充分闡明（Komander，2009）。關于Lys-48和Lys-63鏈的類型，已經確定了一些關鍵作用：Lys-48連接鏈將底物導向26S蛋白酶體介導的降解（Verma等，2004），而Lys-63連接鏈的作用包括的NF-的激活κB途徑和DNA修復途徑的步驟的介導（DiFiglia等，1997； Rahighi等，2009； Tokunaga等，2009）。有趣的是，構成多種類型的病理性包涵體的蛋白質可能被多泛素化，但是它們可能具有抗降解性。例如，多泛素化亨廷頓蛋白聚集在亨廷頓氏病患者的紋狀體和皮層的神經元核內包涵體（NII）和營養不良的神經突上（DiFiglia 等，1997）。

  參考：

  Bonifacino JS，Weissman AM（1998）泛素和分泌和內吞途徑中蛋白質命運的控制。Annu Rev Cell Dev Biol 14，19-57。

  DiFiglia M，Sapp E，Chase KO，Davies SW，Bates GP，Vonsattel JP，Aronin N（1997）腦中神經元核內包涵體和營養不良性神經突的亨廷頓蛋白聚集?？茖W277，1990-3。

  Komander D（2009）蛋白質泛素化的新興復雜性。Biochem Soc Trans 37，937-53。

  Rahighi S，池田F等人。（2009）NEMO對線性泛素鏈的特異性識別對于NF-κB激活很重要。細胞136，1098-109。

  Tokunaga F，Sakata S等人。（2009）NEMO的線性多泛素化在NF-κB激活中的參與。Nat Cell Biol 11，123-32。

  Verma R，Oania R，Graumann J，Deshaies RJ（2004）泛素鏈受體定義了泛素-蛋白酶體系統中的底物選擇性層。電池118，第99-110頁。

  Wilkinson KD（1995）泛素化在蛋白水解和細胞調節中的作用。Ann Nu Rev Nutr 15，161-89。