TriAltus Bioscience CRISPR蛋白

Trialtus Bioscience，LLC（www.trialtusbioscience。。ｃｏｍ）為生命科學(xué)家提供了用于生產(chǎn)和純化基因工程蛋白的工具。我們新穎的親和標(biāo)簽系統(tǒng)只需一步即可提供超高純度和高產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。CL-7親和標(biāo)簽蛋白純化系統(tǒng)已獲得阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校（UAB）的TriAltus Bioscience的許可，現(xiàn)已可商購(gòu)。

活化的Im7樹脂包含高度特異性的彈性Im7結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域與融合到目標(biāo)蛋白的CL7標(biāo)簽（約16 kDa）結(jié)合。用適當(dāng)?shù)牡鞍酌盖懈詈螅械鞍讖呐cIm7結(jié)合的CL7中釋放。有1、2、5和15毫升體積的沉降樹脂（50％懸浮液）可用。

TriAltus的ImM7活化樹脂多可進(jìn)行100次活化，在重復(fù)使用過程中保持1：1的摩爾結(jié)合比。Im7活化樹脂已用于純化多種蛋白質(zhì)-包括膜和多亞基蛋白質(zhì)。

簡(jiǎn)便性–在單個(gè)純化步驟中，此方案可產(chǎn)生具有高產(chǎn)量，高純度和高活性水平的純化蛋白。

可重用性-該IM7樹脂是可重復(fù)使用，在容量沒有可觀察到的損失。

彈性- 該IM7樹脂保留了1：在各種條件下，包括各種鹽和去污劑濃度多個(gè)再活化后1摩爾的結(jié)合比。

規(guī)格書

顆粒大小| 交聯(lián)的garose 6B 珠（45 - 165 μM ）

PH值穩(wěn)定性| Im7蛋白在pH 3-10的珠子上穩(wěn)定。但是，CL7 / Im7結(jié)合僅在pH 4.2 – 10時(shí)穩(wěn)定。

鹽穩(wěn)定性| ≤ 4M NaCl的測(cè)試

裝訂容量| 35-40 mg CL7 / mL 樹脂

儲(chǔ)存/運(yùn)輸濃度| 50/50緩沖液/樹脂漿料。在2、4、10和30毫升漿液中分別加入1、2、5和15毫升的沉降樹脂。

推薦工作溫度| 4°C 或室溫

活化細(xì)節(jié)| 要除去CL7蛋白并重新活化樹脂，請(qǐng)用Gdn-HCl洗滌色譜柱，將其交換為生理緩沖液。

附加信息：靶蛋白特性（例如蛋白大小，構(gòu)象和濃度）；流速（即較低的流速可能會(huì)增加結(jié)合能力）；其他參數(shù)（例如pH和溫度）會(huì)影響色譜柱的結(jié)合能力。

中國(guó)科學(xué)家使用TriAltus Bioscience的CL-7純化系統(tǒng)純化CRISPR相關(guān)蛋白

阿拉巴馬州伯明翰（2018年8月29日）— TriAltus Bioscience，LLC今天宣布，中國(guó)湖北大學(xué)的科學(xué)家只需一步即可成功地從大腸桿菌中共表達(dá)和純化了核糖核蛋白復(fù)合物，包括Cas9和Cas12a CRISPR相關(guān)蛋白。使用該公司許可的CL-7凈化技術(shù)。湖北科學(xué)家于7月下旬發(fā)表了他們的工作結(jié)果。

TriAltus Bioscience執(zhí)行官兼聯(lián)合創(chuàng)始人Bob Shufflebarger說：“該團(tuán)隊(duì)在CRISPR蛋白方面的成功獨(dú)立驗(yàn)證了我們的CL-7純化系統(tǒng)，可以有效地純化用于治療研究的一些重要的蛋白。” “我們相信這項(xiàng)技術(shù)將加強(qiáng)科學(xué)研究，解決使用基因工程蛋白質(zhì)的一些挑戰(zhàn)，并終幫助降低與生物制藥生產(chǎn)相關(guān)的行業(yè)成本。”

湖北省科學(xué)家在論文中寫道：“通過利用超高親和力CL7 / Im7純化系統(tǒng)，我們?cè)隗w內(nèi)和體外實(shí)現(xiàn)了具有深層核酸酶活性的純Cas RNP的一步純化，表明該方法具有很高的實(shí)用價(jià)值。具有大規(guī)模，低成本，短時(shí)間制備CRISPR相關(guān)核酸酶的潛力。”

該論文還指出：“ [此方法簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)高效，可用于制備其他CRISPR相關(guān)核酸酶。”

CRISPR-簇狀規(guī)則間隔的短回文重復(fù)序列的首字母縮寫-是一種基因編輯工具，可有效且特異性地改變生物體內(nèi)的基因。CRISPR相關(guān)（Cas）蛋白（例如Cas9和Cas12a）是CRISPR系統(tǒng)的必需組件，研究人員正越來越多地使用它們來尋找治療癌癥，HIV和鐮狀細(xì)胞病等疾病的潛在方法。

TriAltus Bioscience聯(lián)合創(chuàng)始人，UAB的生物化學(xué)和分子生物學(xué)教授Dmitry Vassylyev博士領(lǐng)導(dǎo)了發(fā)明CL-7技術(shù)的團(tuán)隊(duì)。瓦西里耶夫（Vassylyev）在五個(gè)臭名昭著的具有挑戰(zhàn)性的生物分子上測(cè)試了該方法，結(jié)果*。該研究成果于2017年發(fā)表在《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》（PNAS）上。