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            genetargetsolutions電動大腸桿菌

            更新時間:2019-12-27      點擊次數(shù):2469

            genetargetsolutions電動大腸桿菌

            TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

            應用領域

            • 使用CopyControl™克隆系統(tǒng)生成可誘導的拷貝數(shù)克隆。
            TransforMax™EPI300™  大腸桿菌  細胞缺少  tonA  基因,經(jīng)過改造可與Epicentre的CopyControl™cDNA,基因和PCR克隆試劑盒以及其他不需要噬菌體T1抗性細胞的CopyControl克隆系統(tǒng)一起使用。細胞包含可誘導的突變體  trfA  基因,其基因產(chǎn)物是從ori V 復制起點開始復制所必需的  ,例如在CopyControl pCC1™載體中。在LB氯霉素平板上或在補充氯霉素的LB或SOC培養(yǎng)基中,在TransforMax EPI300 大腸桿菌中生長的CopyControl克隆   從F因子復制子以單拷貝數(shù)復制,因為trfA的表達  基因被抑制。加入CopyControl誘導溶液可誘導細胞表達  trfA  基因產(chǎn)物,并誘導其從ori V 以高拷貝數(shù)復制  (圖1)。從ori V 復制可  產(chǎn)生更高的產(chǎn)量和更高的克隆DNA純度。好處

             

            • 克隆的拷貝數(shù)受到與trfA  基因連接的誘導型啟動子的嚴格控制  。
            • 具有各種大小的克隆的高轉化效率。
            • lacZΔM15  用于重組體的藍/白篩選。
            • 限制-負[ mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]表型能夠有效克隆甲基化DNA。
            • 核酸內切酶負號(endA1),以確保高產(chǎn)量的DNA。
            • 重組減號(recA1),用于較大插入片段克隆的更高穩(wěn)定性。
             
             

            基因型

            F- mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1 endA1 araD139Δ(ara,leu)7697 galU galKλ-rpsL(StrR)nupG trfA dhfr

            TransforMax EPI300電  感受態(tài)大腸桿菌

            • pUC19的轉化效率> 1 x 1010 cfu / µg。

            TransforMax EPI300具有化學活性的  大腸桿菌

            • pUC19的轉化效率> 5 x 108 cfu / µg。

             

            圖1.在TransforMax™EPI300™ 大腸桿菌中, 可以將CopyControl™BAC克隆的拷貝數(shù)誘導10到20倍  加入CopyControl誘導溶液后,來自CopyControl BAC克隆的110-145 kb BAC DNA的產(chǎn)量增加了14倍以上。U =未誘導的細胞;I =誘導的細胞。

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            TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

              
            EC30011010 X 100微升
            EC30015050 X 100微升

            包括CopyControl™誘導溶液和pUC19對照DNA。

            TransforMax™EPI300™具有化學活性的大腸桿菌

            C300C10510 X 50微升

            包括CopyControl™誘導溶液和pUC19對照DNA。

            CopyControl™感應解決方案

            CCIS12525毫升

            1,000X濃縮溶液。過濾器已消毒。

             

             

             

             

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