GMP級干細胞凍存液

上海起發實驗試劑有限公司amsbio專業代理，AMSBIO成立于1987年，公司由艾倫和亞歷克斯聯合創立，總部位于西班牙馬德里，AMSBIO在意大利，瑞士和英國均有辦事處。AMSBIO的使命是成為一個生命科學研究的試劑和服務幫助客戶開發創新的方法，過程，產品和藥品的首要供應商，為學術團體和生物技術合作伙伴提供的技術和成本有效的解決方案。

Amsbio  STEM-CELLBANKER® 說明書

品牌：Amsbio

貨號： 11897 

品名： STEM-CELLBANKER

描述：GMP Grade Stem Cell Cryopreservation Media

產品信息

產品描述

STEM-CELLBANKER ^®是GMP下生產的ES細胞和iPS細胞凍存液 產品特點是化學成分清晰，無動物源成分，專門針對ES細胞和iPS細胞特點設計的細胞凍存液

·  化學成分清楚和無動物源成分

·  按照日本，歐盟，美國和PIC / S GMP指南生產

·  復蘇后保持細胞的高活力

·  解凍復蘇后依然保持干細胞的多能性

·  實現細胞的長期凍存，不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

·  可以不需要液氮就可以長期保存

·  同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細胞凍存

·  STEM-CELLBANKER 已經得到美國食品藥物管理局的認證（生物制品評價和研究中心）

STEM-CELLBANKER ^®是*無的血清和動物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求， 是干細胞治療和應用zui合適的細胞凍存液，STEM-CELLBANKER ^®使用方便，不需要特殊設備和儀器就可以實現干細胞高存活率的凍存和長達10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ^®還顯著增加細胞活力，同時保持細胞多能性，和細胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達到的。

應用實例

使用STEM-CELLBANKER對人體胚胎干細胞（hESC） 和誘導多能（iPS）干細胞進行實際凍存測試。

測試凍存液：STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規細胞凍存液（細胞培養基 + 10% DMSO + 血清代替品）
細胞存活率評估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit試劑盒

測試結果：使用STEM-CELLBANKER凍存液的細胞存活率明顯提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常規細胞凍存液高一倍。同時，結果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

STEM-CELLBANKER用于小鼠腎臟組織凍存比較圖：

圖2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10％福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKER的^ø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10％福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中，壞死或細胞凋亡的跡象都可以忽略不計。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結果。

STEM-CELLBANKER保存的細胞MRNA保存水平圖

圖3.總RNA從小鼠肺成纖維細胞系的任收獲后立即或在-80與STEM-CELLBANKER凍存后的細胞中提取^ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個樣品中的mRNA水平，結果顯示93％的mRNA在±1.6倍差異的范圍內。

 使用STEM-CELLBANKER小鼠胚胎干細胞（129SV）進行實際凍存測試。

細胞株：129SV (Mouse ES cell) 
測試凍存液：ZENOAQ 產品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）
常規自培凍存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖：

使用手冊:

細胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數生長數的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1.    按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

2.    按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。
（參考：5×105 至 5×106 cells/ml）。

3.    取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養細胞(參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去離心管中的上清液。

4.    加入適量的CELLBANKER? 細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為 5×105 至 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。

5.    將離心管中的細胞混合液分裝于已標示*的冷凍保存管中。

6.    直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

7.    若研究者需要液氮保存時，可將*凍結的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細胞復蘇方法

1.    從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃ 振動水浴槽中快速解凍。

2.    待凍存管中細胞混合液*融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。

3.    離心收集培養細胞((參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4.    清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。

5.    加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。

6.    精檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。

儲存方法和保質期

儲存于４度以下。 保質期３年。3個月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計劃時，盡可能冷凍保存。為避免重復凍結-解凍過程可能導致的CELLBANKER品質下降和性能降低，推薦將 100mL 產品分裝小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱凍存。

質量保障承諾

1.    STEM-CELLBANKER 細胞凍存液經過嚴格內毒素、pH、滲透壓和微生物檢查，確保產品不含細菌、霉菌以及支原體。

2.    使用小鼠胚胎干細胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007細胞驗證性能測試凍存細保存活率達８０％以上．

注意事項

1.    CELLBANKER系列產品只供實驗室研究使用，是試劑級產品。

2.    我們推薦用戶在使用本產品之前，事先對所使用的細胞進行至少為期 1 周的
試驗性細胞冷凍保存培養。確認性能后再進行正式凍存。

3.    免責聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產品時所發生的意外負責。

amsbio 其它產品信息：

上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

1：強大的進口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2：產品種類齊全，經營超過700多個品牌，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

3：提供加急服務，貨品一般1-2周到貨。

4：富有競爭力的價格優勢，絕大部分價格有優勢。

5：多年積累良好的信譽，大部分客戶提供貨到付款服務。客戶包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等藥企。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發，歡迎合作。